مهمترین موارد در طراحی پرایمر

تانک الکتروفورز افقی - تانک الکتروفورز عمودی - real time pcr - gel documentation - منبع تغذیه - ترانسلومیناتور UV - ترانسلومیناتور - geldoc - الکتروفورز افقی - منبع تغذیه الکتروفورز - ریل تایم - ژل داک -

1- طول پرایمر

به منظور تکثیر توالی DNA مد نظر محقق در دستگاه ترموسایکلر (دستگاه PCR) لازم است که طول بهینه ای از پرایمر طراحی گردد. طول پرا یمر فاکتوری است که بر اختصاصی بودن... ادامه مطلب

اصول اولیه طراحی پرایمر

تانک الکتروفورز افقی - hot and cool block - پاور - رنگ dna - ترانسلومیناتور safe - ترانسلومیناتور UV - الکتروفورز افقی - ژل داکیومنت - الکتروفورز عمودی - ژل داک -

پرایمر چیست؟

هیچ DNA پلی­ مرازی قادر به ساختن DNA نیست و همه DNA پلی­مرازها به یک انتهای OH ‘3 نیاز دارند تا بتوانند تکثیر را از روی DNA الگو انجام دهند. به همین دلیل برای تکثیر DNA چه در درون سلول و چه در محیط in vitro نیاز به پرایمر (primer است. در واقع پرایمر توالی کوتاهی از جنس DNA است... ادامه مطلب

تکنیک بلاتینگ قسمت دوم

تانک الکتروفورز عمودی - جداسازی و تشخیص پروتئین -

مواد لازم جهت انجام تکنیک ایمونوبلات

1- غشای نیتروسلولز با اندازه منافذ 45/0 میکرومتر یا غشای ایموبیلون (PVDF)

2- بافر انتقال حاوی تریس 25 میلی ­مولار، گلیسین 192 میلی­ مولار و متانول 15 درصد. برای تهیه آن 6 گرم تریس باز و 8/28 گرم گلیسین را در حدود یک لیتر آب مقطر حل کنید. سپس 200... ادامه مطلب

رفع اشکالات الکتروفورز SDS PAGE (الکتروفورز پروتئین)

تانک الکتروفورز افقی - تانک الکتروفورز عمودی - منبع تغذیه - جداسازی و تشخیص پروتئین - جداسازی و تشخیص dna -

رفع اشکالات الکتروفورز

در ذیل مشکلات روتین و معمول که برای الکتروفورز PAGE پیش می­ آید را به همراه دلیل مشکل و روش حل آن ارایه شده است.

اشکال: عدم پلیمریزاسیون یا پلیمریزاسیون ناقص

علت: پایین بودن دمای محلول­ها

راه­کار :... ادامه مطلب

پروتکل انجام تکنیک SDS-PAGE

تانک الکتروفورز عمودی - منبع تغذیه - جداسازی و تشخیص پروتئین - منبع تغذیه الکتروفورز - الکتروفورز عمودی -

آماده ­سازی نمونه

برای آماده ­سازی نمونه در SDS-PAGE بافر نمونه را با نسبت خاصی به نمونه می ­افزایند، سپس برای دقایقی در آب جوش قرار می­دهند. در این شرایط پروتئین­ ها به واسطه اثر SDS و ماده احیا­کننده (در حالت الکتروفورز احیایی) کاملا دناتوره می ­شوند. میزان SDS در بافر نمونه... ادامه مطلب

اصول کلی تکنیک SDS-PAGE

تانک الکتروفورز عمودی - منبع تغذیه - جداسازی و تشخیص پروتئین - الکتروفورز عمودی -

الکتروفورز

فرایند حرکت مولکول های باردار در میدان الکتریکی است. در این فرایند خصوصیات فیزیکی و شیمیایی مولکول­ ها همچون میزان بار، اندازه، شکل و شرایط محیط اطراف آنها از قبیل نگه دارنده، جنس، قدرت یونی و pH بافر، درجه حرارت و مولفه­ های میدان الکتریکی (شدت... ادامه مطلب